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細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦(十)
發(fā)布時(shí)間: 2021-12-03 點(diǎn)擊次數(shù): 1066次今天為大家?guī)砑?xì)胞培養(yǎng)常遇問題的第十期,看看本期都為大家分享常遇的都有哪類型的問題,小編已為各位客官整理出來了~~來,上正片!
46、
▲問:昨天剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞,今天出現(xiàn)這個(gè)情況,會(huì)是什么問題呢?那是不是因?yàn)閮龃娴臅r(shí)候就污染了呢?
答:一片兒一片兒的,黑云彩一樣的,是霉菌污染。也有可能。
47、
▲問:培養(yǎng)液是清亮的,高背景下看細(xì)胞也沒有異常,請(qǐng)問這是霉菌嗎?
答:這個(gè)東西很常見,有可能是血清蛋白沉淀或培養(yǎng)耗材里的雜質(zhì)。
48、
▲問:以上三圖霉菌污染怎么處理么呢?三抗一直在用沒有效果。而且會(huì)長(zhǎng)的越來越多。代數(shù)低的是這樣。少數(shù)有,大多數(shù)沒有。
答:這個(gè)細(xì)胞看起來老化得很嚴(yán)重呀。共用培養(yǎng)箱的其他人有這種污染嗎?可能環(huán)境有污染,沒得到*。
49、
▲問:上面三個(gè)圖,三陰性乳腺癌細(xì)胞,細(xì)胞中間這些空泡是怎么回事呀,是細(xì)胞狀態(tài)不好嘛?
答:細(xì)胞狀態(tài)看著還可以,空泡有可能是雜細(xì)胞或者細(xì)胞凋亡形成的。
問:雜細(xì)胞為啥不是正常細(xì)胞(摻入的細(xì)胞)的形態(tài)呀?
答:如果是MSC,間沖干里面的亮點(diǎn)細(xì)胞是分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞,不是分化,分化不會(huì)發(fā)亮。也有可能雜細(xì)胞或者未貼壁細(xì)胞。
問:就養(yǎng)兩種細(xì)胞,另一種用的同種培養(yǎng)基。
答:還有一種可能,就是細(xì)胞有老化,老化的細(xì)胞形態(tài)會(huì)發(fā)生改變。這個(gè)細(xì)胞狀態(tài)沒問題,不用擔(dān)心。分辨是不是老化比較簡(jiǎn)單,傳代的時(shí)候一瓶密度稍大一些,另一瓶密度稍微小一些,如果是老化,密度小的那瓶異形態(tài)細(xì)胞會(huì)比較多。如果細(xì)胞有老化現(xiàn)象,傳代的時(shí)候注意密度要稍微大一些。中間空泡可能是凋亡細(xì)胞。
50、
問:臍帶MSC原代培養(yǎng)有什么技巧啊?之前分離全被污染了。
答:可用MSC無血清培養(yǎng)基消化法。
問:之前用的是貼壁法呢?
答:也可參考MSC無血清培養(yǎng)基組織塊法操作。
問:整個(gè)培養(yǎng)皿都黏糊糊的,鏡下看都是污染了,沒看到細(xì)胞。
答:原代加慶大霉素預(yù)防得好些。
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